產(chǎn)品信息
貨號(hào)/規(guī)格 | 名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) |
FS1120-2ML | Collagen, Type I, from Rat Tail 鼠尾膠原蛋白I | 2ml(10mg) | 480.00 |
FS1120-10ML | Collagen, Type I, from Rat Tail 鼠尾膠原蛋白I | 10ml(50mg) | 2100.00 |
鼠尾膠原蛋白I(細(xì)胞培養(yǎng)基)
產(chǎn)品描述
膠原蛋白(Collagen)是結(jié)締組織和內(nèi)臟器官外基質(zhì)的主要成分,但在皮膚、肌腱、骨骼中分布為廣泛。膠原蛋白在結(jié)構(gòu)和遺傳學(xué)上被分為不同類型,I型膠原蛋白(Collagen, Type I)結(jié)構(gòu)上是由2個(gè)α1鏈和1個(gè)α2鏈組成300nm長的異源多聚體。當(dāng)用作凝膠時(shí),膠原蛋白有助于體外培養(yǎng)并增強(qiáng)細(xì)胞特異性形態(tài)和功能的表達(dá)。膠原蛋白也可用于薄層以促進(jìn)附著,應(yīng)用包括研究腫瘤細(xì)胞侵襲和遷移,單核細(xì)胞,巨噬細(xì)胞的培養(yǎng)或分化研究,以及粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的放射自顯影研究。膠原I還用于維持肝細(xì)胞功能,分化狀態(tài)和肝細(xì)胞基因轉(zhuǎn)錄水平的升高等研究。
本品是來源與鼠尾,溶于0.02M HAc溶液,濃度為3~4mg/mL,通過SDS-PAGE測(cè)定純度大于90 %,無菌。
鼠尾膠原蛋白I(細(xì)胞培養(yǎng)基)
產(chǎn)品屬性
CAS號(hào):9007-34-5
分子式:NULL
英文名稱:Collagen
英文同義詞:Collagenpowder ;collagens ;BOVINE COLLAGEN TYPE II;COLLAGEN TYPE IV, HUMAN;COLLAGEN, TYPE IV, HUMAN PLACENTA;COLLAGEN TYPE IV (HU PLACENTA);COLLAGEN TYPE V (HU PLACENTA);COLLAGEN, TYPE 5
中文同義詞:膠原粉 ;膠原;骨膠原;膠元蛋白;膠原I蛋白;鼠尾膠;膠原蛋白I;膠原質(zhì)
注意事項(xiàng)
1) 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
2) 整個(gè)操作請(qǐng)于冰上進(jìn)行,因室溫下膠原蛋白I可迅速成膠。
3) 整個(gè)操作請(qǐng)?jiān)跓o菌環(huán)境下無菌操作,避免污染以影響細(xì)胞生長。
使用說明
膠原蛋白I可凝膠到蓋玻片或組織培養(yǎng)皿上或用作細(xì)胞附著的薄膜涂層。細(xì)胞可在凝膠頂部,凝膠內(nèi)或凝膠層之間培養(yǎng)。
薄層包被(Thin coating)程序:
【注意】:包被濃度為5-10μg/cm2,推薦濃度可選5μg/cm2。建議根據(jù)具體的細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)進(jìn)行優(yōu)化。
1)膠原蛋白I用0.02M乙酸稀釋配置50μg/mL工作液,膠原蛋白I不溶于中性pH溶液。
2)以5μg/cm2涂布培養(yǎng)皿,例如:一個(gè)35mm的培養(yǎng)皿的表面積約為10cm2,1~2mL的工作液足以覆蓋此皿。
3)室溫孵育1小時(shí)。
4)小心吸取剩余溶液,用PBS或無血清培養(yǎng)基洗滌以除去多余乙酸。
5)組織培養(yǎng)皿包被后可立即使用,也可風(fēng)干,在2-8℃無菌條件下可貯存長達(dá)一周。
膠凝程序:
膠原蛋白I按以下步驟使其pH達(dá)到堿性時(shí)凝膠
1)將無菌5cm左右的紗布海綿貼在150mm培養(yǎng)皿的蓋子上來制備氨蒸氣室。用氫氧化銨使紗布飽和,把蓋子放在150mm的培養(yǎng)皿上,暫放置一邊。
2)將膠原蛋白I均勻涂布在要包被物的表面上,厚度可以根據(jù)需要改變,膠原蛋白I(50-100μL)足以涂覆22mm的蓋玻片。 對(duì)于直徑100mm的培養(yǎng)皿,每個(gè)加入約6mL; 對(duì)于60mm培養(yǎng)皿添加約2.3mL,對(duì)于35mm培養(yǎng)皿添加約1mL。
3)將涂有膠原蛋白的蓋玻片或帶有蓋子的培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)移到氨蒸氣室并暴露三分鐘。
4)在無菌蒸餾水中(35mm培養(yǎng)皿加5mL,60mm培養(yǎng)皿加10mL等)浸泡涂布的蓋玻片或培養(yǎng)皿30min。吸取原蒸餾水并加0.5-1.0mL無菌蒸餾水,放置在層流罩中過夜。
5)吸出蒸餾水,用含血清的平衡鹽緩沖液溶液代替并保存在2-8°C。
備用膠凝程序:
1)在冰上放置以下物品:膠原蛋白I、無菌10×PBS、無菌蒸餾水、無菌1M NaOH
2)確定膠原蛋白I待使用溶液所需的終濃度的體積。
3)在冰上放置無菌管以收存膠原蛋白I。
4)在無菌條件下執(zhí)行以下步驟。
4.1加入10×PBS(終體積/10)mL
4.2計(jì)算要使用的膠原蛋白I的體積(不要添加到管中直到步驟4.6為止)
終體積x終膠原蛋白I濃度(mg/mL)
_________________________ = 要加入的膠原蛋白量
瓶標(biāo)簽上具體濃度(見具體批號(hào))
4.3向10×PBS溶液中加入(要加入的膠原體積×0.023)mL的無菌冰冷1M NaOH
4.4向4.3溶液中加入下述體積的無菌冰冷蒸餾水:
添加蒸餾水體積=V(終)—V(膠原蛋白)—V(10× PBS)—V(1M NaOH)
4.5混合管中的物質(zhì)并放入冰中。
4.6加入膠原蛋白I并計(jì)算體積,混勻,冰上備用。
5)膠原蛋白I溶液可立即使用或在冰上放置2-3小時(shí)。
6)使用時(shí),無菌條件下將溶液加入到細(xì)胞培養(yǎng)裝置中37°C凝膠30min。